今天鞋百科给各位分享质粒载体有哪些作用的知识,其中也会对什么是质粒,其特点是什么,有什么用途(什么是质粒?其特点是什么?)进行解释,如果能碰巧解决你现在面临的问题,别忘了关注本站,现在我们开始吧!
什么是质粒,其特点是什么,有什么用途
质粒(plasmid)是存在于细胞质中,具有自主复制能力,使其在子代细胞中也能保持恒定的拷贝数,并表达所携带的遗传信息,是闭合环状的双链DNA分子。
其特点是质粒具有自主复制能力,使其在子代细胞中也能保持恒定的拷贝数,并表达所携带的遗传信息。
用途:细菌质粒是DNA重组技术中常用的载体。载体是指把一个有用的外源基因通过基因工程手段,送进受体细胞中去进行增殖和表达的工具。将某种目标基因片段重组到质粒中,构成重组基因或重组体。
扩展资料:质粒的分类
1.根据质粒能否通过细菌的接合作用,可分为接合性质粒和非接合性质粒。接合性质粒带有与接合传递有关的基因。非接合质粒在一定条件下通过与其共存的接合质粒的诱动或转导而传递。
2.根据质粒在细菌内的复制类型可分为两类:严紧控制型和松弛控制型。
严紧控制复制型质粒的复制酶系与染色体DNA复制共用,只能在细胞周期的一定阶段进行复制,当细胞染色体停止复制时,质粒也就不再复制。
松弛控制复制型的质粒的复制酶系不受染色体DNA复制酶系的影响,在整个细胞生长周期中随时都可以复制,在染色体复制已经停止时质粒仍能继续复制。
3.根据质粒的不相容性,可分为不相容性和相容性。不相容性指结构相似、密切相关的质粒不能稳定地共存于同一宿主细菌内的现象,反之为相容性。常用于流行病学的调查。
参考资料:百度百科—质粒
表达载体有什么功能?
表达载体四部分:目的基因、启动子、终止子、标记基因 常用细菌质粒进行构建,构建过程中运用限制性核酸内切酶切割出与目的基因相合的末端(多为黏性末端,也有平末端),采用DNA连接酶连接,导入生物体实现表达。标记基因可帮助识别质粒并检测是否成功整合到染色体DNA中。 表达载体(Expression vectors)就是在**载体基本骨架的基础上增加表达元件(如启动子、RBS、终止子等),是目的基因能够表达的载体。如表达载体pKK223-3是一个具有典型表达结构的大肠杆菌表达载体。其基本骨架为来自pBR322和pUC的质粒复制起点和氨苄青霉素抗性基因。在表达元件中,有一个杂合tac强启动子和终止子,在启动子下游有RBS位点(如果利用这个位点,要求与ATG之间间隔5-13bp),其后的多**位点可装载要表达的目标基因。
pbr32质粒是一种什么样的载体粘粒质粒噬菌体
pbr32质粒是一种什么样的载体粘粒质粒噬菌体
载体条件:
① 分子量小,携带外源DN**段进入受体细胞;
② 复制子,能**于染色体进行自主复制;
③ 多**位点(MCS);
④ 标记基因,便于选择;
⑤ 拷贝数高,易于分离;
⑥ 安全。
λDNA的特点
① ?噬菌体为温和噬菌体。
② ?DNA为双链线性DNA,长度为48502 bp,具有多种限制酶的识别序列,便于外源DN**段的插入和置换.
③两端有cos位点,可以环化。
cos位点(cohensive-end site): ?DNA两端各有12bp的粘性末端,粘性末端形成的双链区域称为cos位点。λ噬菌体基因组特点
?DNA上有66个基因,有一半是必需的,与自身的活动有关;其他约1/3是非必需基因。
λ噬菌体载体的优点
比一般质粒载体容量大的多,可达20kb;
体外包装反应效力高,通常比质粒载体**效率
高100倍,适于构建cDNA文库和真核生物基因组文库
构建质粒载体时需考虑哪些特性
用作**载体的理想质粒一般具备下述特点:
①具有松驰型复制子(如ColE1),复制子(replicon)是质粒自我增殖所必不可少的基本条件,并可协助维持使每个细胞含有一定数量的质粒拷贝。
②在复制子外存在几个单一的酶切位点(或多**位点),以便目的DN**段插入。
③具有插入失活的筛选标记,理想的质粒载体应具有两种抗菌素抗性标志,如氨苄青霉素抗性基因(Ampr)和四环素抗性基因(Tetr)等,以便从平板中直接筛选阳性重组子。
④分子量相对较小和较高的拷贝数。此外,质粒的缺点是容量较小,一般只能接受小于15kb的外来DNA,插入片段过大会导致重组子扩增速度减慢,甚至使插入片段失活。主要是对目的基因**,建立DNA文库和cDNA文库,其上有复制子即可。
质粒在基因工程中的作用是作为什么
质粒在基因工程中是作为载体送进受体细胞中去进行增殖和表达的工具。
质粒具有自主复制能力,使其在子代细胞中也能保持恒定的拷贝数,并表达所携带的遗传信息。细菌质粒是DNA重组技术中常用的载体。载体是指把一个有用的外源基因通过基因工程手段,送进受体细胞中去进行增殖和表达的工具。
将某种目标基因片段重组到质粒中,构成重组基因或重组体。然后将这种重组体经微生物学的转化技术,转入受体细胞(如大肠杆菌)中,使重组体中的目标基因在受体菌中得以繁殖或表达,从而改变寄主细胞原有的性状或产生新的物质。
扩展资料:
质粒的要求:
所有的质粒载体都有三个共同的特征:一个复制子、一个选择性标志和一个**位点。复制子是含有DNA复制起始位点的一段DNA(ori),也包括表达由质粒编码的复制必需的RNA和蛋白质的基因。选择性标志对于质粒在细胞内持续存在时必不可少的。
**位点是限制性内切酶切割位点,外源性DNA可由此插入质粒内,而且并不影响质粒的复制能力,或为宿主提供选择性表型。
参考资料来源:百度百科—质粒载体
参考资料来源:百度百科—质粒