转基因的具体步骤，从目的基因的获得到最后的鉴定，谢谢(转基因的识别)-鞋百科

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转基因的具体步骤，从目的基因的获得到最后的鉴定，谢谢

1:目的基因的获取。有三种方法（1）从基因文库中获取（2）利用PCR技术扩增目的基因（3）人工合成
2：基因表达载体的构建。这个载体一般是质粒。
3：将目的基因导入受体细胞。这个导入植物细胞一般用农杆菌转化法，也可用基因*法或花粉管通道法。
导入动物细胞一般用显微注射法。
导入微生物细胞一般用感受态细胞吸收DNA分子的方法。
4：目的基因的检测与鉴定。这个分为4步：（1）用DNA分子杂交技术检测目的基因是否进入受体细胞（2）用分子杂交技术检测目的基因是否转录出RNA（3）用抗原抗体杂交技术检测目的基因是否翻译出蛋白质（4）进行生物个体水平的鉴定（这步不是一定的，也可不进行）。进行生物个体水平的鉴定举个例子就是比如让虫子去啃食导入抗虫基因的植株，看是否抗虫。

如何正确看待转基因？

如何将基因物质直接转移到细胞内？

在历史的长河中，生物进化的过程是非常缓慢的，有的物种几千万年也没有什么变化。但在一定因素的作用下，则可能由于在遗传过程中发生“突变”，而产生新的物种。所以人们早就梦想着有一天能够人工地控制遗传基因，将基因物质直接转移到细胞内，这种更深层次的“杂交”方法，对遗传工程的发展无疑是非常有价值的。这种非常尖端的技术，可以完全摆脱有性生殖过程和种属的限制，实现遗传物质的交换，从而为人类创造和培养有用的动、植物和微生物新品种，以及为治疗人类遗传疾病，提供了前所未有的有效手段。

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激光打孔法，是将激光聚焦成微米级或亚微米级的微小光点，照射在细胞上，在细胞上打开一个小孔。这个小孔能在一秒钟内自动封闭。生物学家将细胞浸在含有基因物质的培养基里，然后用激光束瞄准细胞，在细胞上开一小孔。基因物质通过小孔流入细胞内，完成基因的直接转移。然后小孔自动封闭，恢复原状，成为一个携带新基因的细胞。这样就完成了遗传物质的“嫁接”过程。

日本三宝乐啤酒公司和日立制作所，利用这种技术，已成功地把外来基因注入大麦有细胞壁的细胞中。他们用激光同时在细胞壁、细胞膜和核膜上打孔，培养液中的基因从这个孔注入细胞。用此法注入基因，几万个细胞在30～40分钟内处理完毕。

基因治疗中的基因转移策略有哪些

基因治疗中的基因转移策略有哪些
基因治疗是指将外源正常基因导入靶细胞，以纠正或补偿因基因**和异常引起的疾病，以达到治疗目的。也包括转基因等方面的技术应用。也就是将外源基因通过基因转移技术将其插入病人的适当的受体细胞中，使外源基因制造的产物能治疗某种疾病。从广义说，基因治疗还可包括从DNA水平采取的治疗某些疾病的措施和新技术。

基因治疗的靶细胞主要分为两大类：体细胞和生殖细胞，如今开展的基因治疗只限于体细胞。生殖细胞的基因治疗是将正常基因直接引入生殖细胞，以纠正**基因。这样，不仅可使遗传疾病在当代得到治疗，而且还能将新基因传给患者后代，使遗传病得到根治。但生殖细胞的基因治疗涉及问题较多，技术也较复杂，因此，如今更多地是采用体细胞基因治疗。体细胞应该是在体内能保持相当长的寿命或者具有**能力的细胞，这样才能使被转入的基因能有效地、长期地发挥“治疗”作用。因此干细胞、前体细胞都是理想的转基因治疗靶细胞。以如今的观点看，骨髓胞是唯一满足以上标准的靶细胞，而骨髓的抽取，体外培养、再植入等所涉及的技术都已成熟；另一方面，骨髓细胞还构成了许多组织细胞(如单核巨噬细胞)的前体。
(1)生殖细胞基因治疗：生殖细胞基因治疗(germ cell gene therapy)是将正常基因转移到患者的生殖细胞（精细胞、卵细胞中早期胚胎）使其发育成正常个体，显然，这是理想的方法。实际上，这种靶细胞的遗传修饰至今尚无实质性进展。基因的这种转移一般只能用显微注射，然而效率不高，并且只适用排卵周期短而次数多的动物，这难适用于人类。而在人类实行基因转移到生殖细胞，并世代遗传，又涉及伦理学问题。因此，就人类而言，多不考虑生殖细胞的基因治疗途径。
(2)体细胞基因治疗：体细胞基因治疗(somatic cell gene therapy)是指将正常基因转移到体细胞，使之表达基因产物，以达到治疗目的。这种方法的理想措施是将外源正常基因导入靶体细胞内染色体特定基因座位，用健康的基因确切地替换异常的基因，使其发挥治疗作用，同时还须减少随机插入引起新的基因突变的可能性。对特定座位基因转移，还有很大困难。
体细胞基因治疗采用将基因转移到基因组上非特定座位，即随机整合。只要该基因能有效地表达出其产物，便可达到治疗的目的。这不是修复基因结构异常而是补偿异常基因的功能**，这种策略易于获得成功。基因治疗中作为受体细胞的体细胞，多采取离体的体细胞，先在体外接受导入的外源基因，在有效表达后，再输回到体内，这也就是间接基因治疗法。
体细胞基因治疗不必矫正所有的体细胞，因为每个体细胞都具有相同的染色体。有些基因只在一种类型的体细胞中表达，因此，治疗只需集中到这类细胞上。其次，某些疾病，只需少量基因产物即可改善症状，不需全部有关体细胞都充分表达。